Comprensione delle punte di pipetta a basso legame

1. Quali sono le punte di pipetta di rilegatura basse?

Punta di pipetta a basso contenuto Sono materiali di consumo di laboratorio progettati per pipetto (pipette) che presentano speciali trattamenti di superficie e/o sono realizzati con materiali specifici. Il loro obiettivo di design principale è quello di Ridurre significativamente l'adsorbimento del campione e la conservazione sulla parete interna della punta .

• Problema principale: Le punte di polipropilene stEard hanno superfici con idrofobicità e carica intrinseca, che possono portare ad un adsorbimento non specifico di alcuni componenti del campione, in particolare biomolecole (come proteine, acidi nucleici) e soluzioni viscose.
• Soluzione: Le punte di legame basse alterano le proprietà superficiali della parete interna attraverso metodi fisici o chimici, rendendola più idrofila e inerte, riducendo così le forze di interazione tra le molecole e la parete della punta.

2. Come funzionano (tecnologie di trattamento superficiale)

Il basso effetto di legame è ottenuto principalmente attraverso le seguenti tecnologie:

• Additivi polimerici speciali: Incorporare specifici additivi polimerici (ad es. Modificatori idrofili) nel materiale di base del polipropilene durante la produzione, dEo al corpo la punta del corpo inerenti alle proprietà a basso legame. Questo è l'attuale metodo mainstream e più stabile.
• Rivestimenti di superficie:
  • Rivestimenti idrofili: Applicazione di un rivestimento idrofilo (ad es. Alcuni rivestimenti polimerici) sulla parete interna per aumentare la bagnabilità superficiale, ridurre la ritenzione liquida e l'adsorbimento delle proteine.
  • Rivestimenti inerti: Applicazione di rivestimenti altamente inerti (ad esempio alcuni derivati ​​del silano) per ridurre i siti di superficie e ridurre al minimo l'adsorbimento chimico.
• Trattamenti di superficie speciali: Alterando la microstruttura e le proprietà chimiche della superficie del polipropilene attraverso metodi fisici (ad es. Trattamento al plasma) o incisione chimica per aumentare l'idrofilia.
• Polypropilene ultra-alta purezza: Utilizzo di materie prime in polipropilene con contenuto di impurità estremamente bassa per ridurre i potenziali siti di adsorbimento causati da impurità.

3. Vantaggi e caratteristiche chiave

• Riduce al minimo la perdita del campione: Questo è il vantaggio fondamentale. Riduce in modo significativo l'adsorbimento e la ritenzione di campioni preziosi, a bassa concentrazione o minimi (ad es. Proteine, DNA, RNA, enzimi, anticorpi, sospensioni cellulari, reagenti viscosi) sulla parete della punta, garantendo il pipettaggio precisione and recupero .
• Migliora la precisione sperimentale e la riproducibilità: Adsorbimento ridotto significa volumi di erogazione più coerenti, abbassando errori sperimentali causati dal trasporto del campione e miglioramento del risultato affidabilità and riproducibilità .
• Riduce il rischio di contaminazione incrociata: Espulsione liquida più completa e meno residui di campionamento riducono il rischio di contaminazione incrociata quando si pipettano sequenziati campioni diversi.
• Ideale per applicazioni sensibili: Riduce al minimo l'impatto sull'attività del campione, rendendoli particolarmente adatti per esperimenti sensibili all'adsorbimento in biologia molecolare, biologia cellulare, proteomica, diagnostica, ecc.
• Migliora la bagnabilità: In genere mostrano una migliore idrofilia, consentendo al liquido di fluire più agevolmente all'interno della punta, riducendo l'aderenza al menisco e la formazione di bolle, portando a un funzionamento di pipettatura più fluido.

4. Applicazioni chiave (quali esperimenti ne hanno particolarmente bisogno?)

I suggerimenti di legame bassi sono altamente raccomandati, quasi essenziali, per le seguenti applicazioni:

• Biologia molecolare:
  • PCR ad alto rendimento, QPCR, DDPCR: riduce la perdita di DNA/modello, garantendo l'efficienza di amplificazione e l'accuratezza della quantificazione.
  • Purificazione dell'acido nucleico e preparazione della libreria: impedisce la perdita di preziosi frammenti di DNA/RNA durante la purificazione.
  • Preparazione del campione NGS: la pipettazione precisa delle librerie minuti è fondamentale.
• Ricerca proteica:
  • Saggi di concentrazione proteica (BCA, Bradford, ecc.): Previene l'adsorbimento delle proteine ​​che porta alla sottovalutazione della concentrazione.
  • Saggi/cinetica di attività enzimatica: garantisce una quantità accurata degli enzimi ed evita la perdita di attività.
  • Preparazione del campione Western blot: pipettatura precisa di proteine ​​in tamponi contenenti SD o agenti riducenti.
  • Purificazione delle proteine ​​(ad es. Raccolta di frazione di cromatografia di affinità): evita la perdita della proteina bersaglio.
• Cultura cellulare ed esperimenti correlati:
  • Passaggi/placcatura di linee cellulari preziose o cellule primarie: riduce la perdita di adesione cellulare all'interno della punta.
  • Saggi di vitalità cellulare: accurata pipettatura di sospensioni e reagenti cellulari.
  • Trasfezione: pipettatura precisa di DNA, RNA, complessi di reagenti di trasfezione.
• Diagnostica e test clinici: ELISA, testimoni chemiluminescenti, POCT: garantisce volumi precisi campioni e reagenti, migliorando la sensibilità e l'accuratezza del rilevamento.
• Soluzioni viscose o soggette a schiuma: Glicerolo, DMSO, soluzioni di tensioattivo, alcuni buffer: riduce la conservazione e il trasporto, migliorando l'accuratezza della pipa.
• Qualsiasi esperimento che coinvolge campioni preziosi, minimi o richiede alta precisione e riproducibilità.

5. Come scegliere la giusta punta di pipetta di rilegatura bassa giusta?

• Compatibilità: Il requisito principale è che loro dovere Sii perfettamente compatibile con il marchio e il modello Pipette. Verificare sempre gli elenchi di compatibilità o consultare la Guida del produttore prima dell'acquisto.
• Certificazioni e qualità:
  • Certificato RNase/DNase/Pyrogen-prive: Fondamentale per gli esperimenti di biologia molecolare e coltura cellulare. Garantire una certificazione affidabile.
  • Certificato senza inibitori della PCR: Molto importante per le applicazioni PCR/QPCR.
  • Qualità della produzione: La produzione di alta qualità garantisce dimensioni precise, forma costante, assenza di bara e mancanza di contaminazione da particolato (grado di pulizia). Scegli marchi affidabili.
• Livello di prestazioni di legame basso: Le prestazioni possono variare tra marchi e serie. Prestare attenzione ai dati sulle prestazioni forniti dal produttore (ad es. Rapporti sui test dei residui di adsorbimento delle proteine). Per applicazioni estremamente impegnative (ad es. Sequenziamento a cellule singole, rilevamento di proteine ​​ad abbondanza ultra-bassa), potrebbero essere necessarie punte di legame basso di alto livello.
• Imballaggio e sterilità:
  • Formato dell'imballaggio: Racked (impilato o sfuso), insaccato, filtrato (facoltativo). Scegli l'imballaggio adatto alle tue esigenze di flusso di lavoro e automazione.
  • Suggerimenti filtrati: Se è necessario prevenire la contaminazione dell'aerosol dell'albero della pipetta, scegliere punte di legame basse con filtri (punte di filtro a basso legame). Il filtro stesso dovrebbe anche essere basso legame.
  • Pre-sterilizzato: La maggior parte degli esperimenti richiede punte pre-sterilizzate (tipicamente irradiate da gamma). Verificare il metodo di sterilizzazione e il livello di garanzia della sterilità (SAL). I suggerimenti non sterili sono adatti per alcune applicazioni non critiche o se il laboratorio esegue la propria sterilizzazione.
• Costo-efficacia: Le punte di legame basse sono generalmente più costose delle punte standard. Valutare il rapporto costo-efficacia mentre soddisfa i requisiti di prestazione. Non compromettere gli esperimenti critici utilizzando suggerimenti standard per risparmiare costi, poiché dati imprecisi o perdita del campione possono portare a maggiori rifiuti.

6. Note di utilizzo

• Allegato adeguato: Assicurarsi che la punta sia collegata in modo sicuro e comodamente alla pipetta senza spazi vuoti per evitare perdite d'aria e volumi imprecisi.
• Pre-bagnare: Per i liquidi viscosi o volatili, il pre-bagni (aspirando e dispensando il liquido alcune volte prima del trasferimento effettivo) a volte può migliorare ulteriormente l'accuratezza (anche con basse punte di legame). Seguire le linee guida operative pipette.
• Evita di toccare le estremità della punta: Mantenere la sterilità e prevenire la contaminazione.
• Magazzinaggio: Conservare in un luogo fresco e asciutto lontano dalla luce solare diretta e dalla polvere. Nota la data di scadenza sulla confezione.