Come evitare incomprensioni comuni nell'uso di punte di pipette a basso legame?

Punta di pipetta a basso contenuto può ridurre significativamente i residui di campioni a causa del loro design idrofobico della superficie interna e sono particolarmente adatti per gestire reagidi costosi, liquidi viscosi o campioni di traccia (come proteine ​​e acidi nucleici). Tuttavia, se non sono gestiti correttamente, possono comunque influire sull'accuratezza e sulla ripetibilità dell'esperimento. Quello che segue è un'analisi di errori e soluzioni comuni in uso in combinazione con le specifiche operative di laboratorio:

Incomprensione 1: ignorare il pre-risezzazione della punta

Operazione sbagliata: aspirare direttamente il campione e omettere il passaggio di pre-rise.

Impatto: sebbene le punte della pipetta a basso legame possano ridurre i residui, per campioni come siero, proteine ​​o solventi organici, le loro pareti interne possono ancora formare un film micro-liquido a causa della tensione superficiale, con conseguente basso volume iniziale di pipettatura.

Approccio corretto: prima della pipettatura formale, ripeti la scusa per aspirazione da 2 a 3 volte con lo stesso campione per formare uno strato di film liquido stabile sulla parete interna della punta (ad eccezione dei liquidi ad alta temperatura/bassa temperatura).

Inconsending 2: la velocità di aspirazione è troppo veloce o l'angolo è inclinato

Operazione errata: aspirare rapidamente il liquido o la pipetta è inclinata più di 20 °.
Impatto:

Pipette troppo veloce: bolle o aspirazione posteriore (liquido si precipita nella pipetta e contamina il pistone);
Pipetta inclinata: cambia la pressione della superficie del liquido, con conseguente volume di tubazione impreciso e un aumento del volume residuo. Approccio corretto:
Pipette lentamente e rilasciare lentamente: operare a una velocità costante e controllare la velocità di rilascio del pistone;
Tieni premuto verticalmente: mantieni l'angolo di inclinazione ≤20 ° quando la punta della pipetta è immersa nella superficie del liquido.
Incomprensione 3: ignorare le differenze operative dei liquidi viscosi
Operazione errata: utilizzare la stessa velocità di pipa di pipettatura dei liquidi ordinari per campioni ad alta viscosità (come il glicerolo e le sospensioni cellulari).
Impatto: i liquidi viscosi scorrono lentamente sulla parete interna della punta della pipetta e una rapida scarica causerà un aumento significativo del volume residuo, compensando i vantaggi del basso design di adsorbimento.
Approccio corretto:

Estendi il tempo di immersione: rimanere sulla superficie del liquido per 1 secondo dopo l'aspirazione prima di rimuoverlo e mettere in pausa per 1 secondo prima di premere la seconda marcia per soffiare il liquido durante la scarica;
Scegli una punta di pipette a bocca larga: per macromolecole o campioni di cellule, utilizzare una punta di pipetta a basso adsorbimento a bassa velocità (70% più grande dell'apertura standard) per ridurre la forza di taglio.
MUNCCECCEZIONE 4: colpire duramente durante l'installazione della punta
Operazione sbagliata: colpire ripetutamente la maniglia della pipetta per "serrare" la punta.
Effetto: l'impatto a lungo termine indosserà i componenti di sigillatura della pipetta, distruggerà l'erguatezza e causerà errori di perdita o volume.
Metodo corretto: inserire la pipetta verticalmente nella punta, premere leggermente e ruotare leggermente a sinistra e a destra per adattarsi.

Ideavenzione 5: archiviazione o riutilizzo errata
Operazione sbagliata:

Metti la pipetta quando c'è un liquido residuo nella punta;
Riutilizzare suggerimenti monouso a basso adsorbimento per risparmiare i costi. Impatto:
Mettere piatto cause di riflusso del liquido per corrodere la molla del pistone;
Il riutilizzo può influire sulla precisione dovuta a contaminazione incrociata o deformazione strutturale. Metodo corretto:
Scartare la punta immediatamente dopo il pipettaggio e appendere la pipetta in verticale;
Il riutilizzo è severamente proibito, soprattutto quando si tratta di esperimenti sensibili come PCR e isotopi.
Consulenza professionale: massimizzare i vantaggi dei suggerimenti a bassa ritenzione
Abbina le proprietà dei liquidi:
Liquidi volatili (come il cloroformio): evitare di utilizzare punte a bassa ritenzione a bassa ritenzione e utilizzare punte di sicurezza con solvente o pipette a pistoni esterne progettate per reagenti volatili.
Verifica di calibrazione:
Pesare regolarmente il peso di acqua pura pipettata con un equilibrio analitico (1 ml = 0,9982 g a 20 ℃) ​​per verificare se il volume effettivo soddisfa lo standard.
Riepilogo dei punti chiave: i suggerimenti a bassa ritenzione migliorano l'accuratezza riducendo la perdita del campione, ma se i dettagli dell'operazione vengono ignorati, potrebbe essere ancora controproducente. L'installazione standardizzata, il controllo della velocità, l'adattamento alle caratteristiche del campione e il rigoroso utilizzo una tantum sono la base per ottenere esperimenti ad alta ripetibilità.